Kit de Detecção de Mutações do Gene EGFR Humano 29 (PCR por Fluorescência) - RUO
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Kit de Detecção de Mutações do Gene EGFR Humano 29 (PCR por Fluorescência) - RUO
Epidemiologia
O câncer de pulmão tornou-se a principal causa de morte por câncer em todo o mundo, representando uma séria ameaça à saúde humana. O câncer de pulmão de não pequenas células corresponde a cerca de 80% a 85% dos casos de câncer de pulmão. O EGFR é atualmente o alvo molecular mais importante para o tratamento do câncer de pulmão de não pequenas células. A fosforilação do EGFR pode promover o crescimento, a diferenciação, a invasão, a metástase, a resistência à apoptose e a angiogênese tumoral. Os inibidores da tirosina quinase do EGFR (TKI) podem bloquear a via de sinalização do EGFR por meio da inibição da autofosforilação do EGFR, inibindo, assim, a proliferação e a diferenciação das células tumorais, promovendo a apoptose das células tumorais, reduzindo a angiogênese tumoral, etc., de modo a alcançar a terapia direcionada ao tumor [1]. Numerosos estudos demonstraram que a eficácia terapêutica dos EGFR-TKI está intimamente relacionada ao status da mutação do gene EGFR e pode inibir especificamente o crescimento de células tumorais com mutação no gene EGFR [2,3]. O gene EGFR está localizado no braço curto do cromossomo 7 (7p12), com um comprimento total de 200 kb e consiste em 28 exons. A região de mutação está localizada principalmente nos exons 18 a 21, sendo a mutação de deleção dos códons 746 a 753 no exon 19 responsável por cerca de 45% dos casos e a mutação L858R no exon 21 por cerca de 40% a 45% [4]. As Diretrizes da NCCN para o Diagnóstico e Tratamento do Câncer de Pulmão de Não Pequenas Células estabelecem claramente que o teste de mutação do gene EGFR é necessário antes da administração de inibidores da tirosina quinase do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR-TKI). Este kit de teste é utilizado para orientar a administração de medicamentos inibidores da tirosina quinase do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR-TKI) e fornecer a base para a medicina personalizada em pacientes com câncer de pulmão de não pequenas células. Este kit é utilizado apenas para a detecção de mutações comuns no gene EGFR em pacientes com câncer de pulmão de não pequenas células. Os resultados dos testes são apenas para referência clínica e não devem ser usados como base exclusiva para o tratamento individualizado de pacientes. Os médicos devem considerar a condição do paciente, as indicações do medicamento e o tratamento em si. A reação e outros indicadores laboratoriais, bem como outros fatores, são utilizados para uma avaliação abrangente dos resultados dos testes.
Canal
| Tampão de reação | Canal |
| Tampão de reação EGFR IC | Canal FAM |
| Tampão de reação L858R | Canal FAM |
| Tampão de reação 19del | Canal FAM |
| Tampão de reação T790M | Canal FAM |
| Tampão de reação G719X | Canal FAM |
| Tampão de reação 3Ins20 | Canal FAM |
| Tampão de reação L861Q | Canal FAM |
| Tampão de reação S768I | Canal FAM |
Parâmetros técnicos
| Armazenar | Líquido: ≤ -18℃ No escuro |
| Prazo de validade | 12 meses |
| Tipo de espécime | tecido tumoral fresco, secção patológica congelada, tecido ou secção patológica incluída em parafina, plasma ou soro |
| CV | <5,0% |
| LoD | A detecção da solução de reação de ácido nucleico em um fundo de 3ng/μL de tipo selvagem pode detectar de forma estável uma taxa de mutação de 1%; b) reação de ácido nucleico Sob uma taxa de mutação de 1%, uma mutação de 1×103 cópias/mL pode ser detectada de forma estável no fundo do tipo selvagem de 1×105 cópias/mL; c) A solução de reação de referência interna pode detectar o produto de referência SW3 com o menor limite de detecção da referência interna da empresa. Quando o kit detecta o material de referência com limite de detecção nacional, o material de referência com limite de detecção de frequência de mutação de 2,5% e a mutação de amplificação do gene EGFR com uma variação no número de cópias de 4 podem ser detectados de forma estável. |
| Especificidade | Não há reatividade cruzada com o DNA genômico humano do tipo selvagem e outros tipos mutantes. |
| Instrumentos aplicáveis | Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500, Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7300, Sistemas de PCR em tempo real QuantStudio® 5, Sistema de PCR em tempo real LightCycler® 480, Sistema de PCR em tempo real BioRad CFX96. |
Fluxo de trabalho
Reagentes necessários, mas não fornecidos:Água livre de DNase/RNase, etanol anidro. Ao testar uma amostra de tecido embebida em parafina, recomenda-se o uso do kit QIAamp DNA FFPE Tissue (56404) da QIAGEN e do kit Paraffin-embedded Tissue DNA Rapid Extraction (DP330) da Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ao testar uma amostra de plasma/soro, recomenda-se o uso do kit Macro & Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que pode ser usado com o extrator automático de ácido nucleico Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) da Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. ou do kit QIAamp Circulating Nucleic Acid (55114) da QIAGEN.
Materiais de consumo necessários, mas não fornecidos.Ponteiras livres de DNase/RNase, luvas descartáveis, tubo de centrífuga livre de DNase/RNase, tiras com 8 tubos para PCR, centrífuga.








