Kit de Detecção de 8 Mutações KRAS (PCR por Fluorescência) - RUO
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Kit de Detecção de 8 Mutações KRAS (PCR por Fluorescência) - RUO
Epidemiologia
Mutações pontuais no gene KRAS foram encontradas em diversos tipos de tumores humanos, com taxas de mutação de aproximadamente 17% a 25% em tumores, 15% a 30% em pacientes com câncer de pulmão e 20% a 50% em pacientes com câncer colorretal. Como a proteína P21, codificada pelo gene K-ras, está localizada a jusante da via de sinalização do EGFR, após a mutação do gene K-ras, a via de sinalização a jusante permanece sempre ativada e não é afetada por fármacos direcionados a montante do EGFR, resultando na proliferação maligna contínua das células. Mutações no gene K-ras geralmente conferem resistência a inibidores da tirosina quinase do EGFR em pacientes com câncer de pulmão e resistência a anticorpos anti-EGFR em pacientes com câncer colorretal [1, 2, 3]. Em 2008, a National Comprehensive Cancer Network (NCCN) publicou uma diretriz de prática clínica para câncer colorretal, que apontou que os sítios de mutação que causam a ativação do gene K-ras estão localizados principalmente nos códons 12 e 13 do éxon 2, e recomendou que todos os pacientes com câncer colorretal metastático avançado sejam testados para mutação do gene K-ras antes do tratamento [4]. Portanto, a detecção rápida e precisa da mutação do gene K-ras é de grande importância para a orientação clínica da medicação. Este kit utiliza DNA como amostra de detecção para fornecer uma avaliação qualitativa do status da mutação, o que pode auxiliar os médicos na triagem de pacientes com câncer colorretal, câncer de pulmão e outros tumores que se beneficiam de terapias-alvo. Os resultados do teste são apenas para referência clínica e não devem ser usados como base exclusiva para o tratamento individualizado de pacientes. Os médicos devem fazer julgamentos abrangentes sobre os resultados do teste com base em fatores como a condição do paciente, indicações de medicamentos, resposta ao tratamento e outros indicadores de exames laboratoriais.
Parâmetros técnicos
| Armazenar | ≤-18℃ |
| Prazo de validade | 12 meses |
| Tipo de espécime | seções patológicas humanas incluídas em parafina |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | a) Os tampões de reação K-ras A e K-ras B podem detectar de forma estável uma taxa de mutação de 1% em um fundo de tipo selvagem de 3 ng/μL; b) Uma mutação de 1×103Cópias/mL podem ser detectadas de forma estável em um fundo de tipo selvagem de 1×105Cópias/mL quando a taxa de mutação é de 1%; c) Quando o limite de detecção (LoD) de referência da empresa SW3 é testado, não há valor de Ct ou o valor de Ct é igual a 0 para o tampão de reação A e o tampão de reação B. |
| Instrumentos aplicáveis | Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500, sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7300, sistemas de PCR em tempo real QuantStudio® 5, sistema de PCR em tempo real LightCycler® 480, sistema de PCR em tempo real BioRad CFX96. |
Fluxo de trabalho
Reagente necessário, mas não fornecido:Água livre de DNase/RNase, etanol anidro. Ao testar uma amostra de tecido embebida em parafina, recomenda-se o uso do kit QIAamp DNA FFPE Tissue (56404) da QIAGEN e do kit de extração rápida de DNA de tecido embebido em parafina (DP330) fabricado pela Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.
Materiais de consumo necessários, mas não fornecidos:Ponteiras livres de DNase/RNase, luvas descartáveis, tubo de centrífuga livre de DNase/RNase, tiras com 8 tubos, centrífuga.







