Kit de Detecção de 8 Mutações KRAS (PCR por Fluorescência) - RUO

Descrição resumida:

[Código do produto] HWTS-TM4009

Descrição resumida

Este kit destina-se à detecção qualitativa in vitro de 8 mutações nos códons 12 e 13 do gene K-ras em DNA extraído de secções patológicas humanas incluídas em parafina.

Apenas para uso em pesquisa


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Kit de Detecção de 8 Mutações KRAS (PCR por Fluorescência) - RUO

Epidemiologia

Mutações pontuais no gene KRAS foram encontradas em diversos tipos de tumores humanos, com taxas de mutação de aproximadamente 17% a 25% em tumores, 15% a 30% em pacientes com câncer de pulmão e 20% a 50% em pacientes com câncer colorretal. Como a proteína P21, codificada pelo gene K-ras, está localizada a jusante da via de sinalização do EGFR, após a mutação do gene K-ras, a via de sinalização a jusante permanece sempre ativada e não é afetada por fármacos direcionados a montante do EGFR, resultando na proliferação maligna contínua das células. Mutações no gene K-ras geralmente conferem resistência a inibidores da tirosina quinase do EGFR em pacientes com câncer de pulmão e resistência a anticorpos anti-EGFR em pacientes com câncer colorretal [1, 2, 3]. Em 2008, a National Comprehensive Cancer Network (NCCN) publicou uma diretriz de prática clínica para câncer colorretal, que apontou que os sítios de mutação que causam a ativação do gene K-ras estão localizados principalmente nos códons 12 e 13 do éxon 2, e recomendou que todos os pacientes com câncer colorretal metastático avançado sejam testados para mutação do gene K-ras antes do tratamento [4]. Portanto, a detecção rápida e precisa da mutação do gene K-ras é de grande importância para a orientação clínica da medicação. Este kit utiliza DNA como amostra de detecção para fornecer uma avaliação qualitativa do status da mutação, o que pode auxiliar os médicos na triagem de pacientes com câncer colorretal, câncer de pulmão e outros tumores que se beneficiam de terapias-alvo. Os resultados do teste são apenas para referência clínica e não devem ser usados ​​como base exclusiva para o tratamento individualizado de pacientes. Os médicos devem fazer julgamentos abrangentes sobre os resultados do teste com base em fatores como a condição do paciente, indicações de medicamentos, resposta ao tratamento e outros indicadores de exames laboratoriais.

Parâmetros técnicos

Armazenar ≤-18℃
Prazo de validade 12 meses
Tipo de espécime seções patológicas humanas incluídas em parafina
CV ≤5,0%
LoD a) Os tampões de reação K-ras A e K-ras B podem detectar de forma estável uma taxa de mutação de 1% em um fundo de tipo selvagem de 3 ng/μL; b) Uma mutação de 1×103Cópias/mL podem ser detectadas de forma estável em um fundo de tipo selvagem de 1×105Cópias/mL quando a taxa de mutação é de 1%; c) Quando o limite de detecção (LoD) de referência da empresa SW3 é testado, não há valor de Ct ou o valor de Ct é igual a 0 para o tampão de reação A e o tampão de reação B.
Instrumentos aplicáveis Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500, sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7300, sistemas de PCR em tempo real QuantStudio® 5, sistema de PCR em tempo real LightCycler® 480, sistema de PCR em tempo real BioRad CFX96. 

 

Fluxo de trabalho

Reagente necessário, mas não fornecido:Água livre de DNase/RNase, etanol anidro. Ao testar uma amostra de tecido embebida em parafina, recomenda-se o uso do kit QIAamp DNA FFPE Tissue (56404) da QIAGEN e do kit de extração rápida de DNA de tecido embebido em parafina (DP330) fabricado pela Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.

Materiais de consumo necessários, mas não fornecidos:Ponteiras livres de DNase/RNase, luvas descartáveis, tubo de centrífuga livre de DNase/RNase, tiras com 8 tubos, centrífuga.


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