Gene de resistência a carbapenêmicos (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome do Produto
Kit de detecção do gene de resistência a carbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescência)
Epidemiologia
Os antibióticos carbapenêmicos são antibióticos β-lactâmicos atípicos com o mais amplo espectro antibacteriano e a atividade antibacteriana mais forte.Devido à sua estabilidade à β-lactamase e baixa toxicidade, tornou-se um dos medicamentos antibacterianos mais importantes para o tratamento de infecções bacterianas graves.Os carbapenêmicos são altamente estáveis a β-lactamases de espectro estendido mediadas por plasmídeos (ESBLs), cromossomos e cefalosporinases mediadas por plasmídeos (enzimas AmpC).
Canal
| Mistura PCR 1 | Mistura PCR 2 | |
| FAM | criança levada | VIM |
| VIC/HEX | Controle interno | Controle interno |
| AC5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parâmetros técnicos
| Armazenar | ≤-18℃ |
| Validade | 12 meses |
| Tipo de amostra | Escarro, colônias puras, swab retal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/mL |
| Especificidade | a) O kit detecta as referências negativas padronizadas da empresa e os resultados atendem aos requisitos das referências correspondentes. b) Os resultados do teste de reatividade cruzada mostram que este kit não apresenta reação cruzada com outros patógenos respiratórios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adenovírus respiratório, Enterococcus ou amostras contendo outros genes resistentes a medicamentos CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Anti-interferência: Mucina, Minociclina, Gentamicina, Clindamicina, Imipenem, Cefoperazona, Meropenem, Cloridrato de Ciprofloxacina, Levofloxacina, Ácido Clavulânico, Roxitromicina são selecionados para teste de interferência, e os resultados mostram que as substâncias interferentes acima mencionadas não apresentam reação interferente para a detecção de genes de resistência a carbapenêmicos KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
| Instrumentos Aplicáveis | Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR em tempo real QuantStudio®5 Sistemas de PCR em tempo real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR em tempo real LightCycler®480 Sistema de detecção de PCR em tempo real LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTecnologia Bioer) Termociclador quantitativo em tempo real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR em tempo real BioRad CFX96 Sistema de PCR em tempo real BioRad CFX Opus 96 |
Fluxo de trabalho
Opção 1.
Reagente de extração recomendado: Kit Geral de DNA/RNA para Macro e Micro-Teste (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que pode ser usado com Extrator Automático de Ácido Nucleico Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) por Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Adicione 200μL de solução salina normal a o talo precipita.As etapas subsequentes devem seguir as instruções para extração e o volume de eluição recomendado é100μL.
Opção 2.
Reagente de extração recomendado: Reagente de Extração ou Purificação de Ácido Nucleico (YDP302) da Tiangen Biotech (Pequim) Co., Ltd. A extração deve ser iniciada estritamente de acordo com a etapa 2 das instruções de uso (adicionar 200 μL de tampão GA ao precipitado do talo , e agite até que o talo esteja completamente suspenso).Use água livre de RNase/DNase para eluição e o volume de eluição recomendado é de 100μL.
Opção 3.
Reagente de extração recomendado: Reagente de liberação de amostra para macro e microteste.A amostra de escarro precisa ser lavada adicionando 1mL de solução salina normal ao precipitado do talo tratado acima mencionado, centrifugado a 13.000r/min por 5 minutos, e o sobrenadante é descartado (guarde 10-20µL de sobrenadante).Para colônia pura e swab retal, adicione 50μL de reagente de liberação de amostra diretamente ao precipitado do talo tratado acima mencionado, e as etapas subsequentes devem ser extraídas de acordo com as instruções de uso.
