Gene de resistência a carbapenêmicos (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome do produto
Kit de detecção de gene de resistência a carbapenêmicos HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescência)
Epidemiologia
Os antibióticos carbapenêmicos são antibióticos β-lactâmicos atípicos com o mais amplo espectro antibacteriano e a mais forte atividade antibacteriana. Devido à sua estabilidade à β-lactamase e baixa toxicidade, tornaram-se um dos medicamentos antibacterianos mais importantes para o tratamento de infecções bacterianas graves. Os carbapenêmicos são altamente estáveis às β-lactamases de espectro estendido mediadas por plasmídeos (ESBLs), cromossomos e cefalosporinases mediadas por plasmídeos (enzimas AmpC).
Canal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Controle Interno | Controle Interno |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parâmetros técnicos
| Armazenar | ≤-18℃ |
| Prazo de validade | 12 meses |
| Tipo de espécime | Escarro, colônias puras, swab retal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Linha de frente | 103UFC/mL |
| Especificidade | a) O kit detecta as referências negativas padronizadas da empresa e os resultados atendem aos requisitos das referências correspondentes. b) Os resultados do teste de reatividade cruzada mostram que este kit não apresenta reação cruzada com outros patógenos respiratórios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovírus respiratório, Enterococcus ou amostras contendo outros genes de resistência a medicamentos CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Anti-interferência: Mucina, Minociclina, Gentamicina, Clindamicina, Imipenem, Cefoperazona, Meropenem, Cloridrato de Ciprofloxacina, Levofloxacina, Ácido Clavulânico, Roxitromicina são selecionados para teste de interferência, e os resultados mostram que as substâncias interferentes mencionadas acima não apresentam reação interferente à detecção dos genes de resistência a carbapenêmicos KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
| Instrumentos aplicáveis | Sistemas de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR em tempo real QuantStudio®5 Sistemas de PCR em tempo real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR em tempo real LightCycler®480 Sistema de detecção de PCR em tempo real LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTecnologia Bioer) Termociclador quantitativo em tempo real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR em tempo real BioRad CFX96 Sistema de PCR em tempo real BioRad CFX Opus 96 |
Fluxo de trabalho
Opção 1.
Reagente de extração recomendado: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que pode ser usado com o Extrator Automático de Ácido Nucleico Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) da Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Adicione 200 μL de solução salina normal ao precipitado do talo. As etapas subsequentes devem seguir as instruções de extração, e o volume de eluição recomendado é100μL.
Opção 2.
Reagente de extração recomendado: Reagente de Extração ou Purificação de Ácido Nucleico (YDP302) da Tiangen Biotech (Pequim) Co., Ltd. A extração deve ser iniciada em estrita conformidade com a etapa 2 das instruções de uso (adicione 200 μL de tampão GA ao precipitado do talo e agite até que o talo esteja completamente suspenso). Utilize água livre de RNase/DNase para eluição, e o volume de eluição recomendado é de 100 μL.
Opção 3.
Reagente de extração recomendado: Reagente de Liberação de Amostra Macro & Micro-Test. A amostra de escarro deve ser lavada adicionando 1 mL de solução salina normal ao precipitado do talo tratado mencionado acima, centrifugada a 13.000 rpm por 5 minutos e o sobrenadante descartado (manter 10-20 µL de sobrenadante). Para colônias puras e swab retal, adicione 50 μL do reagente de liberação de amostra diretamente ao precipitado do talo tratado mencionado acima, e as etapas subsequentes devem ser extraídas de acordo com as instruções de uso.
