Solução de diagnóstico inovadora de TB e DR -TB por #Macro & Micro -Test!

Uma nova arma para diagnóstico de tuberculose e detecção de resistência a medicamentos: um sequenciamento direcionado à nova geração (TNGS) combinado com o aprendizado de máquina para o diagnóstico de hipersensibilidade à tuberculose

Relatório de literatura: CCA: Um modelo de diagnóstico baseado em TNGs e aprendizado de máquina, adequado para pessoas com menos tuberculose bacteriana e meningite tuberculosa.

Título da tese: Sequenciação de próxima geração e aprendizagem de máquina: uma estratégia de diagnóstico ultra-sensível para tubulares pulmonares paucíficos e meningite tubular.

Periódico: 《Clinica Chimica Acta》

Se : 6.5

Data da publicação: janeiro de 2024

Combinado com a Academia de Ciências da Universidade de Ciências e o Hospital de Cabo de Pequim da Capital Medical University, Macro e Micro-Test estabeleceram um modelo de diagnóstico de tuberculose com base na nova geração de tecnologia de seqüenciamento direcionado (TNGS) e aprendizado de máquina, que forneceu Ultra-High Aligh A sensibilidade à detecção para tuberculose com poucas bactérias e meningite tuberculosa, forneceu um novo método de diagnóstico de hipersensibilidade para o diagnóstico clínico de dois tipos de tuberculose e ajudou o diagnóstico preciso, a detecção de resistência a medicamentos e o tratamento da tuberculose. Ao mesmo tempo, verifica -se que o cfDNA plasmático do paciente pode ser usado como um tipo de amostra adequado para amostragem clínica no diagnóstico de TBM.

Neste estudo, foram usadas 227 amostras de plasma e amostras de líquido cefalorraquidiano para estabelecer duas coortes clínicas, nas quais as amostras de coorte de diagnóstico laboratorial foram usadas para estabelecer o modelo de aprendizado de máquina de diagnóstico de tuberculose, e as amostras de coorte de diagnóstico clínico foram utilizadas para verificar o estabelecido estabelecido Modelo de diagnóstico. Todas as amostras foram direcionadas pela primeira vez por um pool de sonda de captura direcionado especialmente projetado para Mycobacterium tuberculosis. Em seguida, com base nos dados de sequenciamento de TB-TNGs, o modelo de árvore de decisão é usado para realizar validação cruzada de 5 vezes nos conjuntos de treinamento e validação da fila de diagnóstico laboratorial, e os limiares de diagnóstico de amostras de plasma e amostras de líquido cerebropinhal são obtidas. O limite obtido é trazido para dois conjuntos de testes de fila de diagnóstico clínico para detecção, e o desempenho diagnóstico do aluno é avaliado pela curva ROC. Finalmente, foi obtido o modelo de diagnóstico de tuberculose.

Fig. 1 Diagrama esquemático do projeto da pesquisa

Resultados: De acordo com os limiares específicos da amostra de DNA do CSF ​​(AUC = 0,974) e amostra plasmática de cfDNA (AUC = 0,908) determinada neste estudo, entre 227 amostras, a sensibilidade da amostra do LCR foi de 97,01%, a especificidade foi de 95,65%e e A sensibilidade e especificidade da amostra de plasma foram de 82,61% e 86,36%. Na análise de 44 amostras emparelhadas de cfDNA plasmático e DNA do líquido cefalorraquidiano de pacientes com TBM, a estratégia de diagnóstico deste estudo tem uma alta consistência de 90,91% (40/44) em cfdNA plasmático e DNA do líquido cerebroespinhoso, e a sensibilidade é 95.45% (42/44). Em crianças com tuberculose pulmonar, a estratégia de diagnóstico deste estudo é mais sensível a amostras de plasma do que os resultados da detecção de XPERT de amostras de suco gástrico dos mesmos pacientes (28,57% vs 15,38%).

Fig. 2 Análise Desempenho do modelo de diagnóstico de tuberculose para amostras populacionais

Fig. 3 Resultados diagnósticos de amostras emparelhadas

Conclusão: Um método de diagnóstico hipersensível para tuberculose foi estabelecido neste estudo, que pode fornecer uma ferramenta de diagnóstico com a maior sensibilidade de detecção para pacientes clínicos com tuberculose oligobacilar (cultura negativa). A detecção de tuberculose hipersensível com base no cfDNA plasmática pode ser um tipo de amostra adequado para o diagnóstico de tuberculose ativa e meningite tuberculosa (amostras de plasma são mais fáceis de coletar do que o líquido cerofrospinal para pacientes suspeitos de tuberculose cerebral).

Link original: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? via%3DiHub

Breve introdução de produtos de detecção da série Macro e Micro-Test Tuberculosis

Em vista da complicada situação da amostra de pacientes com tuberculose e várias necessidades, a macro e o micro-teste fornece um conjunto completo de soluções NGS para extração de liquefação de amostras de escarro, construção e sequenciamento da biblioteca da Qualcomm e análise de dados. Os produtos cobrem o diagnóstico rápido de pacientes com tuberculose, detecção de resistência a medicamentos de tuberculose, digitação da tuberculose de Mycobacterium e NTM, diagnóstico de hipersensibilidade de tuberculose de bactérias negativas e pessoas tuberculosas, etc.

Kits de detecção em série para tuberculose e micobactérias:

Item no Nome do produto conteúdo de teste de produto Tipo de amostra modelo aplicável
HWTS-3012 Agente de liberação de amostra Utilizado no tratamento de liquefação de amostras de escarro, obteve um número recorde de primeira classe, o equipamento de máquinas Sutong 20230047. escarro
HWTS-NGS-P00021 Kit de detecção de quantidade Qualcomm para a tuberculose hipersensível (método de captura de sonda) Detecção de hipersensibilidade não invasiva (biópsia líquida) para tuberculose pulmonar de bactérias negativas e nódulos cerebrais; As amostras de pessoas suspeitas de serem infectadas com tuberculose ou não-tubaculose micobactérias foram analisadas por metagenômica de seqüenciamento de alta profundidade, e as informações de detecção de se a tuberculose ou a não-tubacterium micobacteria foram infectadas e as principais informações de resistência à mycobacium de mycobacium foram fornecidos. Sangue periférico, líquido de lavagem alveolar, hidrotórax e ascite, amostra de punção de foco, líquido cefalorraquidiano. Segunda geração
HWTS-NGS-T001 Kit de tipagem de mycobacterium e detecção de resistência a medicamentos (método de sequenciamento de amplificação multiplex) Teste de digitação de Mycobacterium, incluindo MTBC e 187 NTMA detecção de resistência a medicamentos da tuberculose de Mycobacterium abrange 13 medicamentos e 16 locais de mutação central de genes de resistência a medicamentos. Espão, líquido de lavagem alveolar, hidrotórax e ascite, amostra de punção de foco, líquido cefalorraquidiano. Plataforma dupla de segunda/terceira geração

Destaques: HWTS-NGS-T001 MyCobacterium typing e Kit de detecção de resistência a medicamentos (método de amplificação multiplex)

Introdução ao produto

O produto é baseado nos principais medicamentos de primeira e segunda linha descritos nas diretrizes de tratamento da OMS, macrolídeos e aminoglicosídeos comumente usados ​​nas diretrizes de tratamento do NTM, e os locais de resistência a medicamentos cobrem todos os um grupo de locais relacionados à resistência a medicamentos nos locais OMS CATÁLOGO DE MUTAÇÃO COMPLEXO DE MYCOBACTERIUM TUBERculosis, bem como outros genes e locais de mutação relatados de resistência a medicamentos, de acordo com a investigação e estatística de Literaturas de alta pontuação em casa e no exterior.

A identificação de digitação é baseada nas cepas do NTM resumidas nas diretrizes do NTM publicadas pelo Journal of Tuberculosis e doenças respiratórias e do consenso de especialistas. Os iniciadores de digitação projetados podem amplificar, sequenciar e anotar mais de 190 espécies NTM.

Através da tecnologia de amplificação de PCR multiplex direcionada, os genes de genotipagem e os genes resistentes a medicamentos de Mycobacterium foram amplificados por PCR multiplex, e foi obtida a combinação de genes-alvo a ser detectada. Os produtos amplificados podem ser construídos em bibliotecas de sequenciamento de alta ou terceira geração de terceira geração, e todas as plataformas de sequenciamento de segunda geração e terceira geração podem ser submetidas a sequenciamento de alta profundidade para obter as informações de sequência dos genes alvo. Ao comparar com as mutações conhecidas contidas no banco de dados de referência interno (incluindo o catálogo de mutações do complexo de tuberculose Who Mycobacterium e sua relação com a resistência a medicamentos), foram determinadas mutações relacionadas à resistência a medicamentos ou suscetibilidade aos medicamentos anti-tuberculose. Combinado com a solução de tratamento de amostra de escarro auto-aberta do macro e micro-teste, o problema da baixa eficiência da amplificação de ácido nucleico das amostras de escarro clínico (dez vezes maior que o dos métodos tradicionais) foi resolvido, de modo que a detecção de sequenciamento de resistência a medicamentos pode ser aplicado diretamente a amostras de escarro clínico.

Faixa de detecção de produtos

34genes relacionados à resistência a medicamentos de18medicamentos anti-Tuberculosis e6Drogas NTM foram detectadas, cobrindo297locais de resistência a medicamentos; Dez tipos de Mycobacterium tuberculosis e mais do que190Tipos de NTM foram detectados.

Tabela 1: Informações de 18+6 medicamentos+190+NTM

Vantagem do produto

Forte adaptabilidade clínica: as amostras de escarro podem ser detectadas diretamente com o agente de auto-liquefação sem cultura.

A operação experimental é simples: a primeira rodada de operação de amplificação é simples e a construção da biblioteca é concluída em 3 horas, o que melhora a eficiência do trabalho.

Tipagem abrangente e resistência a medicamentos: cobrindo os locais de digitação e resistência a medicamentos de MTB e NTM, que são os principais pontos da preocupação clínica, a tipagem precisa e a detecção de resistência a medicamentos, apoiando o software de análise independente e geração de relatórios de análise com um clique.

Compatibilidade: compatibilidade do produto, adaptando as plataformas ILM e MGI/ONT.

Especificação do produto

Código do produto Nome do produto Plataforma de detecção especificações
HWTS-NGS-T001 Kit de tipagem de mycobacterium e detecção de resistência a medicamentos (método de amplificação multiplex) Ont 、 Illumina 、 Mgi 、 Salus Pro 16/96RXN

Hora de postagem: janeiro-23-2024